جستجو
این کادر جستجو را ببندید.

کیت الایزا Vitamin D

کیت الایزا برای تعیین غلظت 25 -هیدروکسی ویتامین دی- در سرم انسانی
25-Hydroxyvitamin-D ELISA Kit in Human Serum

تولید کننده: Arka Fan Azma

اساس تست کیت

Competitive ELISA

سایز پکیج‌ها

96 تستی

اختصاصیت تست

۹۹٪

زمان کل انجام تست

105 دقیقه
ویتامین D نوعی سکواستروئید می باشد. این ویتامین دارای دو شکل شیمیایی مجزا ( ویتامین D2 و D3 ) می باشد که از نظر بیولوژیکی دارای اثرات یکسان می باشند. ویتامین D2 یک ملکول 28 کربنی است که از ارگوسترول گیاهی مشتق می شود. در حالیکه ویتامین D3 یک ملکول 27 کربنی است و از کلسترول مشتق می گردد. شکل فعال بیولوژیکی ویتامین D در گردش خون، مشتق 25 هیدروکسیله آن می باشد. وقتی ویتامین D وارد بدن انسان می شود، در کبد هیدروکسیله شده و به شکل فعال آن تبدیل می شود. مشتق 25 هیدروکسیله ویتامین D، شکل عمده ذخیره ویتامین D در بدن می باشد. لذا تعیین غلظت 25-OH-Vitamin D در سرم،نشانگر اولیه سطح این ویتامین در بدن می باشد. کیت OH VitaminD-25 حاضر، به روش رقابتی و به کمک آنتی بادی مونوکلونال طراحی گردیده است. در این روش چاهکها توسط آنتی بادی مونوکلونال که بر علیه مولکول OH VitaminD-25 می باشد پوشش داده می شوند( Coating). استانداردها و نمونه بیماران با آنتی بادی پوشش داده شده در ته چاهکها به همراه بافر استخراج جهت استخراج ویتامین D از پروتئین متصل شونده آن (VitaminD Binding Protein)، مجاور می شوند و پس از انکوباسیون،OH VitaminD -25 که متصل به بیوتین است به چاهکها اضافه می شود که این OH VitaminD-25 بیوتینه (Biotinylated 25-OH VitaminD) با OH VitaminD-25 نمونه ها در اتصال بهآنتی بادیهای کوت شده در چاهکها رقابت می کند، بنابراین هر چه مقدار OH VitaminD-25 در نمونه بیشتر باشد مقدار OH VitaminD-25 بیوتینه کمتری به آنتی بادی های کوت شده متصل می گردد و بالعکس، سپس استرپتاویدین متصل به آنزیم HRP به ویتامین D بیوتینه متصل می شود. پس از شستشو، محلول رنگزا که محتوی هیدروژن پراکسید( H2O2) و کروموژن است به داخل چاهکها ریخته شده و انکوبه می گردد که بعد از انکوباسیون رنگ آبی پدید آمده به صورت معکوس با غلظت OH VitaminD-25 موجود در نمونه ها متناسب است، برای جلوگیری از فعالیت بیش از اندازه و نامناسب آنزیم، محلول متوقف کننده افزوده می گردد که فعالیت آنزیم را مختل کرده و رنگ آبی را به زرد تبدیل می نماید که بهترین جذب نوری را در طول موج 450 نانومتر دارد .